1、壓力在一段時間逐漸變化；
2、壓力瞬間變化（>3kg）。
總結(jié)原因不外乎以下四種情況：有氣泡；漏液；單向閥不良；泵工作相位不正確。
對于第1種情況：一般是在開機的一段時間內(nèi)出現(xiàn)，往往是流動相在色譜柱內(nèi)還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。這些都不屬于儀器問題，只要多平衡一會就會穩(wěn)定。若使用的是梯度程序，由于流動相的比例正處在變化中，壓力也會跟隨變化；
對于第2種情況：通過下面幾步分析，很快就可以確定原因。
首先排除氣泡因素：氣泡的產(chǎn)生是由于流動相中溶解了空氣，在泵壓的作用下空氣會分離出來，氣泡留在泵體內(nèi)排不出去，它不僅影響到流量的準確，泵壓也會不穩(wěn)，這時我們只要打開排廢閥，利用快速沖洗功能很快就能將氣泡趕出。為防止氣泡產(chǎn)生，*辦法就是使用在線脫氣裝置。沒有脫氣機時，流動相要經(jīng)過脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法，雖然簡單但效果不佳，不妨將流動相用微孔濾膜多過濾兩遍，利用真空泵的負壓，將溶解在流動相中的空氣釋放出來，其效果要好些。如果使用中我們發(fā)現(xiàn)，連接過濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動時，這說明過濾頭有堵塞現(xiàn)象必須清洗，你可用10％的硝酸進行超聲15分鐘，如果還有氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。
其次，要檢查的是輸液泵有沒有漏液現(xiàn)象，一般接在泵后的管道漏液會使壓力降低，對壓力穩(wěn)定性影響不大。如果泵內(nèi)柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了，它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀察到泵頭或沖洗管漏液，柱塞墊或柱塞桿肯定有問題。
第三是單向閥不良，當有鹽份或者雜質(zhì)等污染物附著在單向閥內(nèi)球體和閥體表面時，就會破壞密封性，造成輸液的單向性能降低，泵雖然在工作，但就是輸送不好液體，嚴重時不能輸液。反映到壓力上，表現(xiàn)為嚴重不穩(wěn)或沒有壓力。這時你可以卸下單向閥，用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份，再用熱水超聲清洗一遍效果會更好。若清洗后還達不到要求，可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結(jié)構(gòu)比較精細，如果沒有把握最好先不要分解清洗，用超聲波清洗時要注意擺放的位置防止部件震散，否則裝配后效果會不理想。當單向閥內(nèi)的球體損傷時就只有更換了。最后，引起壓力不穩(wěn)還有一種情況，就是泵工作的相位存在問題，這種情況發(fā)生的比較少，可以通過調(diào)節(jié)泵的初始位置解決。以上四個方面基本包含了泵壓不穩(wěn)的所有原因，對于大多數(shù)用戶只要順著這個思路檢查，一般高效液相色譜系統(tǒng)的故障都能得到解決。
